Modulares, vollmotorisiertes Forschungs-Laser-Scanning-Mikroskop mit konfokaler Mikroskopie, FLIM, STED und Hochmultiplexing

Vor diesem Hintergrund soll im Rahmen einer Markterkundung (mit anschließender Ausschreibung) ein potenzieller Partner gefunden werden. Gegenstand ist ein modulares, inverses, vollmotorisiertes Forschungs Laser-Scanning-Mikroskopsystem mit integrierter konfokaler Mikroskopie, Fluoreszenzlebensdauer-Mikroskopie (FLIM), LT-STED-Superauflösung und spektralem Hochmultiplexing. Das System soll hochauflösende Untersuchungen an lebenden und fixierten Zellen, primären Neuronen, Hirngewebe, iPSC-abgeleiteten Zellkulturen, pflanzlichen Geweben sowie Multiplex-FISH-Proben ermöglichen und insbesondere für die Analyse dynamischer Prozesse in lebenden Proben bei minimaler Phototoxizität geeignet sein. Die Plattform muss modular aufgebaut, flexibel erweiterbar und für zukünftige Anwendungen und weitere superauflösende Verfahren vorbereitet sein. ___Das System muss aus einem inversen, vollmotorisierten Forschungsmikroskop bestehen, welches für Durchlicht-, Fluoreszenz- und konfokale Laser-Scanning-Mikroskopie ausgelegt ist. Erforderlich sind: • motorisierte Fluoreszenzeinheit mit mindestens sechs Positionen, • motorisierter Objektivrevolver mit mindestens sechs Positionen und integriertem Überlaufschutz, • motorisierter Z-Fokus mit einer Schrittweite <4 nm und einer Wiederholgenauigkeit <20 nm, • zusätzlicher piezogetriebener Z-Tisch mit mindestens 500 µm Verfahrweg und Nanometerpräzision, • motorisierter XY-Tisch mit mindestens 120 × 80 mm Verfahrbereich und einer Wiederholgenauigkeit ≤ 0,25 µm, • Kameraport, • ergonomische Bedieneinheit zur Steuerung von X-, Y- und Z-Bewegungen, • LED-Durchlicht- und Fluoreszenzbeleuchtung, • Vorbereitungen zur Integration zusätzlicher Lichtquellen. Das System muss für Langzeit-Lebendzellmessungen mit Temperaturregelung bis mindestens 37 °C sowie CO2-Regelung (0–20 %) und vibrationsfreier Befeuchtung geeignet sein. ___Das System muss mindestens folgende Objektive umfassen: • Luftobjektiv 10×, NA ≥ 0,3, • Multi-Immersionsobjektiv 20×, NA ≥ 0,75, • Wasserimmersionsobjektiv mit hoher numerischer Apertur (NA ≥ 1,2), mit optimaler chromatischer Korrektur für STED-Mikroskopie und mit motorisiertem Korrekturring, • Glycerinimmersionsobjektiv mit hoher numerischer Apertur (NA ≥ 1,3), mit optimaler chromatischer Korrektur für STED-Mikroskopie und mit motorisiertem Korrekturring, • Ölimmersionsobjektiv 100×, NA ≥ 1,4, mit optimaler chromatischer Korrektur für STED-Mikroskopie. Die hochauflösenden Objektive müssen über den gesamten Spektralbereich von mindestens 400–900 nm vollständig chromatisch korrigiert sein. ___Das System muss über einen aktiv gekühlten Scanner mit resonantem und nichtresonantem Modus verfügen für maximale Flexibilität bei hochauflösenden und schnellen Aufnahmen und über parallaxenfreie Dreispiegeltechnik für die homogene Ausleuchtung in einem sehr großen Sehfeld. Erforderlich sind: • maximale Bildgröße (nicht resonanter Modus) 22 mm Diagonale in der Zwischenbildebene mindestens 8192 × 8192 Pixel, • resonanter Scanmodus (13 mm Diagonale in der Zwischenbildebene) mit mindestens 16 kHz Linienfrequenz, 3 Farben simultan mit 2496 x 2496 Pixeln, • Bildraten von mindestens 28 Bildern/s bei 512 × 512 Pixeln, • Scanoptik mit hoher Transmission (>99 %) über den gesamten sichtbaren Spektralbereich (400-850 nm). ___Das System muss eine filterfreie spektrale Detektion ohne Lücken im Spektrum ermöglichen. Erforderlich sind: • Die spektrale Auftrennung soll mittels eines hochtransmissiven dispersiven Prismas erfolgen, welches eine hohe Transmission über alle Wellenlängen und Polarisationsrichtungen gewährleistet, • mindestens fünf unabhängige Einzelphotonen-detektierende Hybrid-Detektoren: - 2 Detektoren mit Photonen-Detektionseffizienz >58% bei 500 nm, >10% bei 810 nm, Photonen-Detektions Totzeit <1,3 ns; - 2 Detektoren mit GaAsp-basierter Technologie mit Photonen- Detektionseffizienz >46% bei 500 nm. Sehr geringes Dunkelrauschen für Imaging und quantitative Messmethoden wie FLIM. Photon-Detektions Totzeit <1,6 ns; - 1 Detektor für Nahinfrarot-Detektion mit Silizium-Technologie. Photonen- Detektionseffizienz ca. 33% bei 700 nm, ca. 12,5% bei 850 nm. Sehr geringes Dunkelrauschen für Imaging und quantitative Messmethoden wie FLIM. Photon-Detektions Totzeit <1,3 ns. • frei einstellbare Emissionsfenster mit einer spektralen Auflösung von mindestens 1 nm, • spektraler Detektionsbereich von mindestens 410–850 nm, • Messung und sofortiger Zugang zu Informationen über durchschnittliche Ankunftszeit und Anzahl (Intensität) der Photonen und Software-Werkzeuge, die mit diesen Informationen arbeiten (daher sind gepulste Laser im gesamten Bereich von 440 nm bis 790 nm, Detektoren und schnelle Elektronik mit Einzelphotonenzählbarkeit zwingend nötig, • Darstellungsmodus der Ankunftszeit (farbkodiert) parallel zur Intensität, • Unterscheidung zwischen erwünschtem und unerwünschtem Fluoreszenzsignal durch Zuordnung und Auftrennung in Zeitfenster und deren Darstellung in unterschiedlichen Kanälen, bis zu 16 einstellbare Zeitfenster (timegates) gleichzeitig, • Trennung von Fluorophoren anhand lebensdauerbasierter Informationen, • Nachweis und Quantifizierung von molekularen Wechselwirkungen (z. B. Protein- Protein) mithilfe lebensdauerbasierter FRET-Messungen. ___Das separat anzufordernde vollumfängliche Informationsschreiben gibt einen genauen Überblick über weitere Anforderungen zu Anregungseinheit, FLIM, Multiplexing, STED-Superauflösung, Software, Rechner, Zubehör und Service. Bitte fordern Sie dieses unter Angabe des Bekanntmachungstitels an: ta-vergabestellevol@hu-berlin.de.